葛根芩連片的含量測定研究進展(一)

目錄

1.葛根芩連片的簡要介紹 2

2. 葛根芩連片中主要活性成分的含量測定 2

2.1葛根芩連片中葛根主要活性成分葛根素的含量測定方法 2

2.1.1 采用HPLC色譜法 2

2.1.2 采用薄層掃描法 2

2.2 葛根芩連片中黃連主要活性成分鹽酸小檗堿的含量測定方法 3

2.2.1 采用HPLC色譜法 3

2.3 葛根芩連片中黃芩主要活性成分黃芩苷的含量測定方法 3

2.3.1采用 HPLC色譜法 3

2.3.2采用間接競爭ELISA法 4

2.4葛根芩連片中多種活性成分同時測定的方法 4

3. 總結 5

參考文獻 6

1.葛根芩連片的簡要介紹

葛根芩連片為《中國藥典)［1］2015年版一部收載品種，由葛根、黃芩、黃連和炙甘草等4味中藥經提取精制濃縮后加適量輔料壓制而成包糖衣或薄膜衣的片劑。葛根芩連片為臨床常用中成藥具有解肌清熱、止瀉止痢的功效，用于治療濕熱蘊結所致的泄瀉、痢疾，癥見身熱煩渴、下痢臭穢、腹痛不適等病癥。近年來，隨著對中藥復方制劑質量標準研究的不斷深入，醫藥工作者越來越意識到中藥復方制劑的功效是藥品內含成分整體作用的體現，是多種成分、多種機制的綜合作用的結果，僅僅憑借以某一化學成分為對照的定性和定量的中藥質量控制方法，不能真正反映中藥的內在綜合質量，因此提出了中藥整體控制模式。現行藥典對葛根芩連片質量控制主要是對葛根素、鹽酸小檗堿和黃芩三種活性成分含量的檢測。對葛根芩連片的整體控制方法進行探索性研究，選取近十幾年對葛根芩連片含量檢測的文獻，現將文獻綜述如下：

2. 葛根芩連片中主要活性成分的含量測定

2.1葛根芩連片中葛根主要活性成分葛根素的含量測定方法

2.1.1 采用HPLC色譜法

陳紅軍［2］采用高效液相色譜法，色譜柱為Zorbax SB-C18 (250×4.6mm，5um)，流動相為甲醇：水：冰醋酸(23：77：1)，柱溫30℃，檢測波長為250nm，供試品溶液制備采用30％甲醇超聲提取20min。結果：葛根素在0.003916～0.391 6mg·mL-1 濃度范圍內與峰面積積分值呈良好的線性關系(r=0.9999)；重現性6份葛根素含量的RSD為0.85％；供試品溶液在48h內穩定；平均回收率為100.40％，RSD為0.42％。

李向陽等［3］采用高效液相色譜法，色譜柱為Hypersil C18柱(4.6×250 mm，5 um)，柱溫40℃，甲醇：乙腈：水 (6：9：85) 為流動相，檢測波長為250 nm；供試品溶液制備采用甲醇超聲提取30min。結果：葛根素在0.0776～0.7760 ug呈良好的線性范圍 (r=0.99997)；重現性5份葛根素含量的RSD為2.96％；平均回收率為101.02％，RSD為2.91％。

劉利敏等［5］采用高效液相色譜法二元梯度洗脫，色譜柱Agilent Eclipse XDB-C18柱(5 um，4.6×250 mm)；流動相A為甲醇，流動相B為0.2％磷酸溶液，檢測波長：277 nm；柱溫：30℃；供試品溶液制備采用70%甲醇超聲提取40min。結果：葛根素在0.1783～3.5650 ug (r=0.9998) 范圍內線性關系良好；重復性6份葛根素含量的RSD為0.7％；供試品溶液在40h內穩定；平均加樣回收率分別為98.8％。

王海嗚等［7］采用Diamonsil C18(250×4.6 mm，5um)色譜柱，以甲醇：乙腈：水(8：12：80)為流動相，檢測波長為250 nm，柱溫為30℃，供試品溶液制備采用50％甲醇超聲提取20 min。結果：葛根素在5.43～543.2 g／mL（r=0.9999）范圍內呈良好的線性；精密度6針峰面積的RSD為1.5%；供試品溶液在12h內穩定；方法加標回收率為100.0％，RSD為1.6％。

2.1.2 采用薄層掃描法

閔慶旺等［10］采用硅膠GF254薄層板，定以乙酸乙酯：甲酸：水(8：l：1)為展開劑，采用單波長反射鋸齒掃描，測定波長為275nm。結果：線性范圍在0.38~3.8ug，r=0.9993；精密度6個斑點峰面積比值RSD為1.47％；供試品溶液在3h內穩定；平均回收率為96.87％，RSD為2.04%。

宋金榮［11］采用0.3％CMC:Na(1：4)硅膠GF254薄層板，展開劑為氯仿：甲醇：乙醇乙酯：水(14：6：3：1)，采用雙波長反射鋸齒掃描，參比波長370 nm，測定波長254 nm。結果：葛根素在0.5～2.5 ug范圍內呈良好的線性關系(r=0.9992)；精密度5個斑點峰面積積分值的RSD為1.78%；供試品溶液在2.5h內穩定；平均回收率97.99％，RSD為2.10％。

2.2 葛根芩連片中黃連主要活性成分鹽酸小檗堿的含量測定方法

2.2.1 采用HPLC色譜法