王不留行抗人肝癌細胞株HepG2的作用研究(一)

1.緒論

肝癌(liver cancer)是指發生于肝臟的惡性腫瘤，包括原發性肝癌和轉移性肝癌兩種，人們日常說的肝癌指的多是原發性肝癌。原發性肝癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一，根據最新統計，全世界每年新發肝癌患者約六十萬，居惡性腫瘤的第五位。原發性肝癌的病因及確切分子機制尚不完全清楚，目前認為其發病是多因素、多步驟的復雜過程，受環境和機體雙重因素影響。

現代研究表明，王不留行花炒爆后入藥，易于煎出有效成分，且走散力較強，長于活血通經、下乳、通淋。

國內外對王不留行的研究主要集中在化學成分方面，王不留行種子含多種環苷、環肽和黃酮苷類成分，如洋芹素-6-c-阿拉伯糖-葡萄糖苷，洋芹素-5-C-雙葡葡糖苷，王不留行黃酮苷等，但未對其抗氧化活性及抗腫瘤作用方面尚缺乏系統且深入的研究

目前王不留行抗腫瘤活性多有報道，但大多集中于活性成分及復發中藥研究領域。王不留行具有抗腫瘤作用，多用于乳腺癌，肝癌，肺癌及其他軟組織之惡性腫瘤。對各種良性腫瘤特別是乳腺良性腫塊有一定療效。但對于其詳細的體外抗腫瘤尤其是肝細胞腫瘤的活性及抗腫瘤作用機制的研究報道較少。有報道顯示王不留行經過一系列分離純化得到組分能明顯抑制內皮細胞增殖、遷移及粘附[1,2]。至今，有關王不留行體外抗腫瘤活性研究報道較少，缺乏系統且深入的研究。

2實驗材料和方法

2.1材料與儀器

2.1.1儀器

垂直層流潔凈工作臺 上海上凈凈化設備有限公司

CO2培養箱 日本ANYO公司

低/高速臺式離心機 上海安亭科學儀器廠

酶標儀 伯樂生命醫學產品有限公司

倒置生物顯微鏡 重慶光電儀器有限公司

96孔板 美國Coning公司

立式壓力蒸汽滅菌器 上海申安醫療器械廠

鼓風干燥箱 上海躍進醫療器械廠

電子天平 奧豪斯儀器有限公司

旋轉蒸發儀（SB–1000，N–1000) 日本東京理化株式會社

流式細胞分析儀 BectonDickinsonFACScan,FranklinLakes,NJ,USA

2.1.2試藥及試劑

RPMIMedium1640培養液 美國Hyclone公司

胎牛血清 美國HyClone公司

胰蛋白酶 北京拜爾迪生物公司

MTT四甲基偶氮唑鹽 美國Amresco公司

二甲基亞砜 國藥集團化學試劑有限公司

臺盼藍 Amresco公司

鹽酸阿霉素 中國藥品生物制品檢定所

藥用乙醇（95%） 盤錦天源藥業有限公司

其他試劑均為分析純