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        畢業論文標題:

        油菜轉錄因子BnWRI1提高種子含油量的研究

         本文ID:LWGSW11455 價格:收費積分/100
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        生物工程論文編號:SW097  論文字數:11263,頁數:24

        目錄
        中文摘要……………………………………………………………………………………… I
        英文摘要……………………………………………………………………………………  Ⅱ
        目錄…………………………………………………………………………………………  Ⅲ
        1.  緒論………………………………………………………………………………………1
         1.1  油菜研究的背景與意義……………………………………………………………1
         1.2  我國油菜研究的現狀………………………………………………………………1
         1.3  基因工程技術在提高油菜含油量方面的應用……………………………………1
         1.4  利用轉基因技術進一步提高油菜含油量的研究…………………………………3
        2.  實驗部分………………………………………………………………………………… 4
         2.1  實驗材料……………………………………………………………………… ……4
          2.2  構建BnWRI1種子特異表達載體…………………………………………………5
         2.3  擬南芥的轉化過程及其篩選……………………………………………………… 7
         2.4  BnWRI1種子特異表達結構擬南芥轉化植株的PCR鑒定…………………………8
         2.5  擬南芥種子重量和種子含油量的測定…………………………………………… 9
        3.  結果與討論……………………………………………………………………………… 12
         3.1  BnWRI1超表達載體構建結果分析…………………………………………………12
         3.2  擬南芥抗性植株篩選結果………………………………………………………… 13
         3.3  瓊脂糖凝膠電泳結果分析………………………………………………………… 13
         3.4  擬南芥種子重量和種子含油量的測定結果分析………………………………… 14
         3.5  RT-PCR結果分析……………………………………………………………………17
        4.  前景與展望……………………………………………………………………………… 18
        致謝…………………………………………………………………………………………… 19
        參考文獻……………………………………………………………………………………… 20

        摘  要:油菜是我國和國際上最主要的油料作物之一,食用和能源兩大戰略需求都對提高油菜含油量提出了新的要求。轉錄因子也稱為反式作用因子,是能夠與真核基因啟動子區域中順式作用元件發生特異性相互作用的DNA結合蛋白,以序列特異的方式識別并結合靶基因啟動子的位點,調節(激活或抑制)啟動子活性進而調控基因轉錄。油脂合成代謝涉及眾多酶系,對單一結構基因的表達調控,難以充分發揮油脂高效積累的潛能。利用轉錄因子提高脂肪酸合成整體代謝水平,提供了高油育種的新途徑。WRI1是擬南芥脂肪酸合成關鍵調控基因,該基因突變導致種子含油量下降80%。我們已從油菜中克隆了WRI1的同源基因BnWRI1,將BnWRI基因籽粒特異表達載體NAPIN Pr::BnWRI1轉化擬南芥,并對轉化植株進行PCR檢測,通過對其中35個T3株系的檢測結果表明BnWRI1可提高種子含油量和重量,(提高幅度最高可達27%)表現種子油脂積累水平提高。綜合以上結果,我們認為BnWRI1基因與擬南芥WRI1基因功能相似,在種子油脂積累過程中發揮轉錄因子的作用;在種子中特異超量表達BnWRI1是基因工程提高含油量的有效途徑。上述結果為后繼基因工程高油育種提供關鍵的分子依據。
        關鍵詞:BnWRI1;油菜;轉錄因子;種子含油量;擬南芥

        Increasing Seed Oil Content by Seed-specific Over-expression of
         Transcription Factor BnWRI1
        Abstract: Rape is one of the most important oil-bearing crops in my country and the international community,Edible and energy are the two major strategies to improve the oil content of rape made new demands . Transcription factor, also known as trans-acting factor , with eukaryotic gene promoter regions of cis-acting element specificity of the interaction of DNA-binding protein, A sequence-specific manner to identify and target genes with the promoter sites, regulation (activation or inhibition) promoter activity thereby regulating gene transcription .Oil biosynthesis involves many enzymes Structure of a single gene expression regulation Oil is difficult to give full play to the potential of efficient accumulation The use of transcription factors increase the overall synthesis of fatty acid metabolism Provide high oil breeding new avenues .WRI1 is the key regulatory genes of Arabidopsis fatty acid synthesis, The mutation resulted in seed oil content decreased 80%. We cloned from the rape of a WRI1 homologous gene BnWRI1, Grain will BnWRI specific gene expression vector rapeseed Pr : : BnWRI1 into Arabidopsis , Transformed plants with PCR , Through which 35 T3 lines to the test results showed BnWRI1 can raise the seed oil content and weight ,( Increases of up to 27% ) Seed oil accumulation performance level . These results , We believe BnWRI1 genes similar whit WRI1 Arabidopsis genes, In the seed oil accumulation process play a role of transcription factors; in Seeds, specific overexpressed BnWRI1 is an effective way of genetic engineering to increase oil content. The results of subsequent genetic engineering breeding high oil provide key molecular basis.
        Keywords: BnWRI1; Rape;Transcription factor ;Seed oil content ;Arabidopsis


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