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          畢業論文標題:

          微生物轉化發酵法生產天然香料β-苯乙醇的研究

           本文ID:LWGSW11402 價格:收費積分/100
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          本站會員可自行下載:下載地址 微生物轉化發酵法生產天然香料β-苯乙醇的研究 (收費:12800 積分)  

          生物工程論文編號:SW150  論文字數:11914,頁數:29

          目  錄
          中文摘要 I
          英文摘要 III
          目錄 v
          1. 緒論 1
           1.1 產品概述 2
            1.2國內外技術發展概況和發展趨勢 3
           1.3本課題的研究意義 6
           1.4本課題的研究任務 7  

          2.實驗部分 8
          2.1 實驗材料 8
          2.2 實驗方法 9
           2.3結果與討論 10
              2.4 原生質體制備 16
           3 結果與討論 17
           3.1 影響原生質體形成因素 17
          3.2 紫外誘變劑量選擇 18
          4 總結與展望 19
          4.1 總結 19
          4.2 展望 20
          致謝 21
          參考文獻 22

          摘 要:本論文以克魯維氏酵母細胞生物轉化生成的天然香料β-苯乙醇為研究對象,主要研內容包括:轉化 L-苯丙氨酸生成 β-苯乙醇酵母菌株的確定;發酵液中底物和產物的定量檢測方法;搖瓶培養,包括培養基組成的優化及培養工藝
          優化;原生質體的制備以及底物誘變,抗反饋抑制優化;β-苯乙醇的結構鑒定。
           從實驗室保藏的菌種中篩選出一株克魯維氏酵母:Kluyveromyces marxious   ,能夠將L-苯丙氨酸轉化為β-苯乙醇。根據 L-丙氨酸和 β-苯乙醇的化學結構特征,建立了測定發酵液中底物和產物的方法:高效液相色譜法測定β-苯乙醇;高效液相色譜法測定底物 L-苯丙氨酸;該法處理簡單、快速、定量準確、回收率高、重復性好,可有效的用于β-苯乙醇產生菌的菌種選育和發酵
          工藝研究中。
           為了提高產物濃度,對培養基配方和發酵條件進行優化,確定了優化了的培
           養條件:  菌種培養基(YPD):酵母浸膏 10g/L, 蛋白胨20g、L, 葡萄糖20g/L    發酵培養基:蔗糖 35g/L、L-苯丙氨酸 6g/L,磷酸二氫鉀 0.4g/L,YNB1.8g/L;
          種子培養基培養 24h,接種量 6%,優化培養基初始 pH=5.5,裝液量 50mL/250mL,溫 28℃,轉速 220r/min,在此條件下發酵 48h 。

          關鍵詞:克魯維酵母,微生物轉化,L-苯丙氨酸,β-苯乙醇
           
          Abstract: β-phenylethanol(β-PE) is a higher aromatic alcohol with a rose-like odour. The fragrance of the rose is highly popular and desired, making β-PE the most-used fragrance chemical in perfume and cosmetics. It is also used in flavor compositions for food. Most of the world's annual production of several thousand tons is synthesized by chemical means but, due to increasing demand for natural flavors,  alternative production methods are being sought. Harnessing the Ehrlich pathway of yeasts by bioconversion of L-phenylalanine to β-PE could be an good option.
           In this work, systematic studies were carried out on the screening of yeast strains which can transform L-phenylalanine to β-PE; determination, isolation, purification,  identification, quantification method of β-PE Kluyveromyces marxious was screened from the microorganism strains preserved by our laboratory. According to the chemical structures of L-phenylalanine and β  -phenylethanol, we established some methods for the separation and determination of them: RP-HPLC method for the separation and determination of L-phenylalanine and β-phenylethanol, this method was accurate, sensitive and reliable.
           The conditions of liquid fermentation of β-PE were studied. It showed that the effect of single factors, such as carbon source, nitrogen source, growth factors and inorganic salts on the production of β-PE. Through orthogonal test, the optimum medium composition had been obtained. It was 35g/L sucrose, 6g/L L-phenylalanine, 0.4g/L KH2PO4 and 1.8g/L YNB. The optimum shaking culture condition was as follows: 24 hours strain age, 6% inoculation quantity, initial medium pH=5.48, 50 mL medium in 250mL shaking flask, 28℃, 220r/min shaking speed, 48 hours incubation.        
          Keywords: Kluyveromyces marxious ,bio-transform, L-phenylalanine, β-PE


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