灰葡萄孢（Botrytis cinerea）T-DNA插入突變體研究

浙江工業大學畢業設計（論文）申報表
                                                                                    
2010年   11  月  9   日
題   目 灰葡萄孢（Botrytis cinerea）T-DNA插入突變體研究
專   業 生物技術 學生人數 1
指導教師 朱廷恒 職    稱 副教授
課題內容：(國內外現狀簡介；重點要解決的問題)
 灰霉菌又名灰葡萄孢（Botrytis cinerea），可以引起200多種植物灰霉病，包括黃瓜、番茄、葡萄等重要的經濟作物。目前對灰霉菌的分子生物學研究比較薄弱，生長、產孢、生物學、生理生化、抗藥性、致病性等分子機制還不清楚，從分子水平研究其相應機制可以為防治該菌提供科學依據。
 重點解決的問題是構建和研究灰葡萄孢T-DNA突變體，進行表現型鑒定，克隆相關基因。
課題的準備情況及對學生的要求：（文獻、儀器設備、材料、預做、實驗場所（工作地點）及學生須具備的技能）
 已有的材料：灰葡萄孢單倍體菌株
 文獻：Rolland S, et al. 2003. Agrobacte-rium-mediated transformation of Botrytis cinerea, simple purification of monokaryotic transformants and rapid co-nidia-based identification of the transfer-DNA host ge-nomic DNA flanking sequences. Current Genetics, 44 (3): 164-171.；
 Mathias C,et al.2007. Botrytis cinerea virulence factors: new insights into a necrotrophic and polyphageous pathogen. FEMS Microbiology Letters,277(1):1 – 10.
要求：態度端正，勤奮好學。    實驗場所：分子調控學團隊 生環樓510
課題內容性質 理論研究/ √實驗研究/ 工程設計/ 工程技術研究/ 軟件開發
課題來源性質 √教師科研課題/教師收集的生產實際的課題/學生自立課題 類型 設計/√論文
 實習地點及時間 生環樓510（201011-201106） 用機時數 
學科負責人意見：

                                                                                       簽名：                                 年    月    日
 
主管院長意見：

                   簽名：                                 年    月    日

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2010年   11  月  9   日
題   目 灰葡萄孢（Botrytis cinerea）致病相關基因研究
專   業 生物技術 學生人數 1
指導教師 朱廷恒 職    稱 副教授
 課題內容：(國內外現狀簡介；重點要解決的問題)
 灰霉菌又名灰葡萄孢（Botrytis cinerea），可以引起200多種植物灰霉病，包括黃瓜、番茄、葡萄等重要的經濟作物。研究表明灰葡萄孢可以產生水解酶、毒素、活性氧等來殺死植物。目前對灰霉菌抗藥性和致病性等分子機制還不清楚，從分子水平研究其相應機制可以加深對其和植物互作的認識。
 重點解決的問題是對篩選出的致病突變體進行研究，包括表型鑒定、功能分析等。
課題的準備情況及對學生的要求：（文獻、儀器設備、材料、預做、實驗場所（工作地點）及學生須具備的技能）
 已有的材料：灰葡萄孢突變體
 文獻：Rolland S, et al. 2003. Agrobacterium-mediated transformation of Botrytis cinerea, simple purification of monokaryotic transformants and rapid co-nidia-based identification of the transfer-DNA host ge-nomic DNA flanking sequences. Current Genetics, 44 : 164-171.
 Liu YG,et al. 1995 Thermal asymmetric interlaced PCR:automatable amplification and sequencing of insert end fragment from P1 and YAC clones for chromosome walking. Genomics. 25: 674 - 681.
 要求：態度端正，勤奮好學。    實驗場所：分子調控學團隊 生環樓510
課題內容性質 理論研究/ √實驗研究/ 工程設計/ 工程技術研究/ 軟件開發
課題來源性質 √教師科研課題/教師收集的生產實際的課題/學生自立課題 類型 設計/√論文
 實習地點及時間 生環樓510（201011-201106） 用機時數 
學科負責人意見：

                                                                                       簽名：                                 年    月    日
 
主管院長意見：

                   簽名：                                 年    月    日

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2010年   11  月  9   日
題   目 農桿菌介導的灰葡萄孢突變體構建
專   業 生物技術 學生人數 1
指導教師 朱廷恒 職    稱 副教授
 課題內容：(國內外現狀簡介；重點要解決的問題)
 灰霉菌又名灰葡萄孢（Botrytis cinerea），可以引起200多種植物灰霉病，包括黃瓜、番茄、葡萄等重要的經濟作物。利用農桿菌介導法構建T-DNA插入突變體庫，篩選出相應的表現型并對其進行鑒定是目前采用的有效研究分子水平上的致病等機制的重要手段，可以為防治該菌提供科學依據。
 重點解決的問題是利用農桿菌轉化法將T-DNA轉入灰葡萄孢、創建插入失活的基因突變體庫。
課題的準備情況及對學生的要求：（文獻、儀器設備、材料、預做、實驗場所（工作地點）及學生須具備的技能）
 文獻：Rolland S, et al.2003.Agrobacte-rium-mediated transformation of Botrytis cinerea, simple purification of monokaryotic transformants and rapid co-nidia-based identification of the transfer-DNA host ge-nomic DNA flanking sequences. Current Genetics, 44 (3): 164-171.
 Mathias C,et al.2007. Botrytis cinerea virulence factors: new insights into a necrotrophic and polyphageous pathogen. FEMS Microbiology Letters,277(1):1 – 10.
 要求：態度端正，勤奮好學。    實驗場所：分子調控學團隊 生環樓510
課題內容性質 理論研究/ √實驗研究/ 工程設計/ 工程技術研究/ 軟件開發
課題來源性質 √教師科研課題/教師收集的生產實際的課題/學生自立課題 類型 設計/√論文
 實習地點及時間 生環樓510（201011-201106） 用機時數 
學科負責人意見：

                                                                                       簽名：                                 年    月    日
 
主管院長意見：

                   簽名：                                 年    月    日

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2010年   11  月  9   日
題   目 灰葡萄孢突變體的鑒定和基因功能分析
專   業 生物技術 學生人數 1
指導教師 朱廷恒 職    稱 副教授
 課題內容：(國內外現狀簡介；重點要解決的問題)
 灰霉菌又名灰葡萄孢（Botrytis cinerea），可以引起200多種植物灰霉病，包括黃瓜、番茄、葡萄等重要的經濟作物。利用農桿菌介導法構建T-DNA插入突變體庫，篩選出相應的表現型并對其進行鑒定是目前采用的有效研究分子水平上的致病等機制的重要手段，可以為防治該菌提供科學依據。
 重點解決的問題是對突變體進行表型鑒定、利用農桿菌轉化法將完整的基因轉入突變體進行遺傳互補等。
課題的準備情況及對學生的要求：（文獻、儀器設備、材料、預做、實驗場所（工作地點）及學生須具備的技能）
 文獻：Rolland S, et al.2003.Agrobacte-rium-mediated transformation of Botrytis cinerea, simple purification of monokaryotic transformants and rapid co-nidia-based identification of the transfer-DNA host ge-nomic DNA flanking sequences. Current Genetics, 44 (3): 164-171.
 Arbelet D,et al.2010.Disruption of the Bcchs3a Chitin Synthase Gene in Botrytis cinerea Is Responsible for Altered Adhesion and Overstimulation of Host Plant Immunity. Molecular Plant-Microbe Interactions,23(10):1324-1334
 要求：態度端正，勤奮好學。    實驗場所：分子調控學團隊 生環樓510
課題內容性質 理論研究/ √實驗研究/ 工程設計/ 工程技術研究/ 軟件開發
課題來源性質 √教師科研課題/教師收集的生產實際的課題/學生自立課題 類型 設計/√論文
 實習地點及時間 生環樓510（201011-201106） 用機時數 
學科負責人意見：

                                                                                       簽名：                                 年    月    日
 
主管院長意見：

                   簽名：                                 年    月    日

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2010年   11  月  9   日
題   目 基因工程菌米曲霉(Aspergillus oryzae)產纖維素酶能力研究
專   業 生物技術 學生人數 1
指導教師 朱廷恒 職    稱 副教授
課題內容：(國內外現狀簡介；重點要解決的問題)
 纖維素酶在為開辟食品及發酵工業原料新來源，提高飼料的營養價值，綜合利用農副產品和生物質轉化方面起著非常重要的作用，具有重要的經濟意義。纖維素酶是一類纖維素水解酶的總稱，它由c1酶、cx酶等組成，將纖維素分解成纖維二糖，再經過β-葡萄糖苷酶作用，最終變為葡萄糖。重點解決的問題是對轉入swollen基因的米曲霉進行產纖維素酶的研究，為開發用于食品等行業的生物安全的纖維素酶打下基礎。
 
課題的準備情況及對學生的要求：（文獻、儀器設備、材料、預做、實驗場所（工作地點）及學生須具備的技能）
 本課題已具備基因工程菌米曲霉。  
 文獻：1、Shou Takashima, Hiroshi Iikura, Akira Nakamura. Overproduction of recombinant Trichoderma reesei cellulases by Aspergillus oryzae and their enzymatic properties[J]. Journal of Biotechnology,1998,65:2-3
 2、Rashid Muhammad, Javed Muhammad, Kawaguchi. Improvement of Aspergillus oryzae for hyperproduction of endoglucanase: expression cloning of cmc-1 gene of Aspergillus aculeatus[J]. Biotechnol Letter, 2008,30:2165-72.
 要求學生具備微生物學，生物化學等學科的基本知識及實驗操作技能；態度端正，勤奮上進。
課題內容性質 理論研究/ √實驗研究/ 工程設計/ 工程技術研究/ 軟件開發
課題來源性質 √教師科研課題/教師收集的生產實際的課題/學生自立課題 類型 設計/√論文
 實習地點及時間 生環樓510（201011-201106） 用機時數 
學科負責人意見：

                                                                                       簽名：                                 年    月    日
主管院長意見：

                   簽名：                                 年    月    日